|
|
Příprava experimentálního systému pro studium životního cyklu myšího polyomaviru
Pergner, Jiří ; Španielová, Hana (vedoucí práce) ; Mašek, Tomáš (oponent)
Příprava experimentálního systému pro studium životního cyklu myšího polyomaviru Abstrakt: Myší polyomavirus je modelovým zástupcem virové čeledi Polyomaviridae. Do této čeledi patří i některé významné lidské patogeny (BKV, JCV, Merkel cell polyomavirus). Díky některým svým vlastnostem viry z této čeledi mohou sloužit i jako vektory pro genovou terapii, nebo pro přípravu rekombinatních vakcín. Nové metodické přístupy mohou pomoci k porozumění dosud neznámých faktů ze životního cyklu myšího polyomaviru. Objasnění některých dějů životního cyklu může být důležité z hlediska možného využití polyomavirů pro terapeutické účely. Tato diplomová práce se zabývá přípravou dvou inovativních experimentálních systémů, které rozšiřují možnosti studia životního cyklu myšího polyomaviru. První část diplomové práce je zaměřena na přípravu rekombinantního myšího polyomaviru exprimujícího žlutý fluorescenční protein (EYFP) v časných fázích infekce. Takový virus může být vhodným nástrojem pro studium šíření infekce v živých buňkách metodami fluorescenční mikroskopie i průtokové cytometrie. Lze jej využít i pro studium kolokalizace nestrukturního proteinu velkého T antigenu s některými buněčnými proteiny. V druhé části diplomové práce je popsána příprava hybridní buněčné linie připravené fúzí myších a opičích buněk. Tato...
|
|
|
In planta produkce nanočástic specifické délky s použitím RNA a obalového proteinu Viru tabákové mozaiky (TMV)
Dlabalová, Lucie ; Moravec, Tomáš (vedoucí práce) ; Šafářová, Dana (oponent)
Virus tabákové mozaiky je jedním z vůbec nejprozkoumanějších virů, jeho vlastnosti a struktura jsou plně známy. Z tohoto důvodu byl v této práci vybrán jako biotemplát pro tvorbu nanočástice nastavitelné délky. Pokud je za fyziologických podmínek přítomna jak virová RNA, tak obalový protein, částice jsou schopny se samouspořádat a jejich délka je závislá na délce balené RNA. Podmínkou přednostního balení virové RNA je přítomnost enkapsidačního signálu, který byl identifikován již v 80. letech. V této práci jsme vytvořili dvoukomponentový systém, kdy byly rostliny Nicotiana bentamiana infikovány defektní RNA (dRNA) určenou k zabalení a RNA pomocného viru poskytující všechny komponenty nutné pro replikaci a balení dRNA. V RNA pomocného viru byl navíc vyřazen enkapsidační signál, aby nedocházelo k balení nesprávně dlouhých částic. Některé námi vytvořené pomocné viry navíc obsahovaly obalový protein modifikovaný v oblasti vnitřního kanálu částice. Tato modifikace by měla v budoucnu umožnit specifické vyplnění částic kovem. V rámci práce bylo připraveno několik variant jak dRNA, tak i pomocných virů, aby bylo možné identifikovat jednotlivé oblasti důležité pro replikaci, stabilitu a enkapsidaci vznikajících nanočástic. U rostlin infikovaných jednotlivými systémy jsme poté zjišťovali hlavně to, zda došlo...
|
|
|
In planta produkce nanočástic specifické délky s použitím RNA a obalového proteinu Viru tabákové mozaiky (TMV)
Dlabalová, Lucie ; Moravec, Tomáš (vedoucí práce) ; Šafářová, Dana (oponent)
Virus tabákové mozaiky je jedním z vůbec nejprozkoumanějších virů, jeho vlastnosti a struktura jsou plně známy. Z tohoto důvodu byl v této práci vybrán jako biotemplát pro tvorbu nanočástice nastavitelné délky. Pokud je za fyziologických podmínek přítomna jak virová RNA, tak obalový protein, částice jsou schopny se samouspořádat a jejich délka je závislá na délce balené RNA. Podmínkou přednostního balení virové RNA je přítomnost enkapsidačního signálu, který byl identifikován již v 80. letech. V této práci jsme vytvořili dvoukomponentový systém, kdy byly rostliny Nicotiana bentamiana infikovány defektní RNA (dRNA) určenou k zabalení a RNA pomocného viru poskytující všechny komponenty nutné pro replikaci a balení dRNA. V RNA pomocného viru byl navíc vyřazen enkapsidační signál, aby nedocházelo k balení nesprávně dlouhých částic. Některé námi vytvořené pomocné viry navíc obsahovaly obalový protein modifikovaný v oblasti vnitřního kanálu částice. Tato modifikace by měla v budoucnu umožnit specifické vyplnění částic kovem. V rámci práce bylo připraveno několik variant jak dRNA, tak i pomocných virů, aby bylo možné identifikovat jednotlivé oblasti důležité pro replikaci, stabilitu a enkapsidaci vznikajících nanočástic. U rostlin infikovaných jednotlivými systémy jsme poté zjišťovali hlavně to, zda došlo...
|
|
|
Příprava experimentálního systému pro studium životního cyklu myšího polyomaviru
Pergner, Jiří ; Mašek, Tomáš (oponent) ; Španielová, Hana (vedoucí práce)
Příprava experimentálního systému pro studium životního cyklu myšího polyomaviru Abstrakt: Myší polyomavirus je modelovým zástupcem virové čeledi Polyomaviridae. Do této čeledi patří i některé významné lidské patogeny (BKV, JCV, Merkel cell polyomavirus). Díky některým svým vlastnostem viry z této čeledi mohou sloužit i jako vektory pro genovou terapii, nebo pro přípravu rekombinatních vakcín. Nové metodické přístupy mohou pomoci k porozumění dosud neznámých faktů ze životního cyklu myšího polyomaviru. Objasnění některých dějů životního cyklu může být důležité z hlediska možného využití polyomavirů pro terapeutické účely. Tato diplomová práce se zabývá přípravou dvou inovativních experimentálních systémů, které rozšiřují možnosti studia životního cyklu myšího polyomaviru. První část diplomové práce je zaměřena na přípravu rekombinantního myšího polyomaviru exprimujícího žlutý fluorescenční protein (EYFP) v časných fázích infekce. Takový virus může být vhodným nástrojem pro studium šíření infekce v živých buňkách metodami fluorescenční mikroskopie i průtokové cytometrie. Lze jej využít i pro studium kolokalizace nestrukturního proteinu velkého T antigenu s některými buněčnými proteiny. V druhé části diplomové práce je popsána příprava hybridní buněčné linie připravené fúzí myších a opičích buněk. Tato...
|
host ::
RSS.